寵物檢測熒光pcr是一種基于dna復制和擴增的技術，其適用于檢測特定序列的dna，并從中獲得更多或全部的dna。pcr可以在短時間內產生大量純的、具有特定序列的dna分子，是現代分子生物學的基礎技術之一。而熒光pcr則是一種在傳統(tǒng)聚合酶鏈反應的基礎上加入熒光探針以實現更準確的檢測方法。
原理是這樣的：先需要收集需要檢測的寵物樣本，如口腔拭子、血液或組織等樣本。然后需要使用熱解法將其中的dna裂解，使其變?yōu)閱捂?。接著添加兩個特異性引物單元，即“前向引物”和“反向引物”，并加入熒光探針，該探針含有一個熒光染料和一個淬滅染料，可以與細胞外核酸(gc)結合。當引物與模板相互作用時，在3'端區(qū)域上進行擴增，此時探頭發(fā)生水解，導致熒光染料從淬滅染料釋放，并且發(fā)生熒光信號釋放，以此來檢測pcr反應產物?？梢酝ㄟ^實驗室設備觀察pcr反應體系中熒光信號變化的趨勢，即可對樣品dna進行定量或定性分析。
利用特定引物擴增所有目標區(qū)域內存在的dna，引物的設計根據目標序列的基本信息選擇合適的引物序列，使其在pcr過程中，能夠按照特定規(guī)則穩(wěn)定地結合到待擴增模板的特定位置上。與普通pcr不同，熒光pcr選用帶有熒光生物素標簽的引物，可以將擴增的目標串聯片段和引物結合成一個分子。通過real-timepcr系統(tǒng)可以同時進行擴增反應和融合曲線分析。這樣，在后期的熒光檢測過程中，就可以對所擴增目標片段的數量進行準確的定量。
寵物檢測熒光pcr技術的其他優(yōu)勢還包括：
高度靈敏性：可以從非常小的樣本量開始擴增，探測樣本中確定污染，擴增低拷貝的模版。
高速度：相比傳統(tǒng)pcr技術，不需要進行后續(xù)電泳與染色分析，可以在更短的時間內完成檢測。
高熱穩(wěn)定性引物和熒光探針被特意設計，確保了其在高溫下不會失活或降解。